Különbség a választható jelölő és a reporter gén között | Választható Marker vs Reporter Gene

Kulcskülönbség - Választható Marker és Reporter Gene

A genetikai technikát fontos gének átruházására használják a szervezetből egy másik szervezetbe. Az idegen gén egy másik szervezet genomjába való beillesztése és a gazdasejtben való expressziója a génátvitel legnehezebb lépései. Az átalakítási folyamat sikerességének kimutatásához szelektálható markert és riportergént alkalmaznak a rekombináns molekulában. A szelektálható marker egy olyan DNS-szekvencia vagy gén, amely a nem transzformált sejtekből transzformált sejteket expresszálja és kiválasztja. A riportergén egy másik gén, amelyet arra használnak, hogy megkülönböztesse a transzformált sejteket, és számszerűsítse vagy észlelje, hogyan működik a beillesztett gén a gazdaszervezetben. A szelektálható marker és riportergén között a legfontosabb különbség az, hogy a szelektálható markert a nem transzformált sejtek kiszűrésére és a transzformált sejtek jelzésére használják, miközben a riportergént a gazda expressziójának szintjének meghatározására használják a gazdaszervezetben.

Tartalomjegyzék

1. Áttekintés és kulcskülönbség

2. Mi a választható jelző

3. Mi a Reporter Gene

4. Side by Side Összehasonlítás - Választható Marker vs Reporter Gene

5. Összefoglaló

Mi a választható jelző?

A géntechnológiában a kérdéses gént megfelelő vektorba helyezzük és gazdaszervezetekké alakítjuk át. Az átalakulás azonban csak az illetékes gazdasejtekben sikeres, és lehetőség van arra, hogy a gazdasejtek elutasítsák az idegen DNS felvételét. Ezért a transzformált és nem transzformált sejtek differenciálódása fontos további kísérletezés folytatásához. Ezért a kutatók szelektálható markergént tartalmaznak a vektorhoz a transzformált sejtek nem transzformált sejtek könnyű szelekciójához. A szelektálható marker egy DNS-szekvencia, különösen egy olyan gén, amely a transzformált sejtek azonosításában hasznos. Ez a markergén olyan tulajdonságot mutat, amely alkalmas transzformált sejtek mesterséges szelekciójára a nem transzformált sejteken egy médiumon.

A molekuláris biológiában használt leggyakoribb szelektálható markerek az antibiotikum rezisztens gének. Egy antibiotikum rezisztencia gént beiktatunk a vektorba, és gazdasejtekké alakítjuk át, különösen a gazdasejt baktériuma számára. Ez az antibiotikum beépül a baktérium termesztő közegébe. A szelektív marker jelenléte miatt szelektív körülmények között csak azok a sejtek maradhatnak fenn, amelyek a megfelelő szelektálható markert tartalmazzák.A nem transzformált sejtek nem képesek növekedni az antibiotikumot tartalmazó tápközegben. Ezért a szelektálható marker, amely antibiotikum rezisztens, a transzformált sejtek könnyen azonosíthatók.

Az antimetabolitokra jellemző tulajdonságokat mutató gének szelektív markerként használatosak a növényi génsebészetben alkalmazott klónozó vektorokban. Azonban ez a szelektív markerek genetikailag módosított organizmusokká való átalakulása negatív hatást gyakorol a környezetre és az emberre. Az antibiotikum rezisztens baktériumok felszabadulása növelheti az emberi kórokozók antibiotikum-rezisztenciáját. A termék vagy biomassza antibiotikumokkal szennyezheti, és az antibiotikumok lebomlása és inaktiválása következtében elveszítheti a szelektív nyomást.

01. ábra: A génátvitelhez szükséges plazmidvektor szelektálható markerrel

Mi a Reporter Gene?

Reporter gének olyan gének, amelyek lehetővé teszik a beillesztett gén expressziójának kimutatását vagy mérését. Ezeket a riporter géneket kapcsolhatjuk az érdekes gén szabályozó szekvenciáihoz a expressziós hely vagy szintek jelzésére. Ezért ugyanazon promoter alatt lévő gének expressziója során egyetlen mRNS-szekvenciára átíródnak, majd egy olyan fehérjévé alakulnak át, amely jelezheti a génexpresszió szintjét.

A riportergének különbözőek, vizuálisan azonosítható jellemzőkkel rendelkeznek, amelyek általában fluoreszkáló és lumineszcens fehérjékben vesznek részt. A fluoreszcens fehérjét és enzimeket kódoló gének, a láthatatlan szubsztrátumok lumineszcens vagy színes termékekké történő átalakításával a sikeres génkifejezés jelzésével és a génexpresszió kvantitatív meghatározásának lehetőségével.

02. ábra: Reporter Gene Expression

Mi a különbség a választható Marker és Reporter Gene között?

- diff Artikel Közel a táblázat előtt ->

Választható Marker vs. Reporter Gene
Választható marker egyfajta DNS-szekvencia, amely segít megkülönböztetni a transzformált sejteket a nem transzformált sejtekkel.	Reporter gén egy olyan gén, amely segít megszámolni a kívánt gén expresszióját a gazdasejtbe.
A gyártott egységek természete
A gének olyan jellemzőkkel vannak kódolva, amelyek segítik a mesterséges szelekciót a táptalajon.	A gének vizuálisan azonosítható tulajdonságokkal vannak kódolva.
Használat
Az antibiotikum rezisztencia gének, antimetabolit gének, herbicidrezisztencia gének stb. Példák a szelekciós markerekre.	A zöld fluoreszcens fehérje, a p-glükuronidáz, a kloramfenikol-acetil-transzferáz, a vörös fluoreszcens fehérje stb.

Összefoglaló - Választható marker és reporter gén

Választható markerek lehetővé teszik a transzformált sejtek növekedését szelektív tápközegben, amelyet adott antibiotikum vagy gyomirtó szerrel adagolnak. A transzformált sejtek korai kiválasztására használják őket. Reporter géneket alkalmazunk a kívánt gén expressziójának mértékére. Ezenkívül lehetővé teszik a transzformált és nem transzformált sejtek differenciálódását. Ez a különbség a szelektálható marker és a riporter gén között.Mind a szelektálható marker, mind a riporter gén fontos génsebészeti markereknek tekinthetők.

Referenciák:

1. Ziemienowicz, Alicja. "Növényi szelekciós markerek és riportergének. „SpringerLink. Springer-Verlag, n. d. Web. 2017. március 23.

2. Shih, Chen-Han, Hsiao-Yin Chen, Hung-Chieh Lee és Huai-Jen Tsai. "A lila kromoprotein-gén mint új szelekciós markerként szolgál a Microalga Nannochloropsis oculata transzgeneziséhez. "PLOS ONE. Nyilvános Tudományos Könyvtár, n. d. Web. 25 Március 2017

Kép szívesség:

1. "Plazmid a betétekkel" Michael Jeltsch - Saját munkák (CC BY-SA 4. 0) Commons Wikimedia alatt

2. "Reporter gén" A TransControl en. wikipedia (CC BY-SA 3. 0) Commons Wikimedia alatt