Különbség a YAC és az M13 fágvektor között | YAC vs M13 Phage Vector
Kulcs különbség - YAC vs M13 fág vektor
A DNS-klónozás fontos folyamat, amely lehetővé teszi a szervezetek fontos DNS-fragmenseinek terjedését. Megköveteli, hogy a specifikus DNS vektor-DNS-sel összekapcsolódjon rekombináns DNS létrehozására, amely átalakul a gazdaszervezetbe. A vektor olyan DNS-molekula, amely viselkedik, mint hordozó, hogy külföldi genetikai anyagot más sejtbe vagy szervezetbe szállítson. Képesnek kell lennie a gazdaszervezeten belüli reprodukálásra és a rekombináns DNS több másolatának előállítására. A DNS-klónozásban különböző típusú vektorok használatosak. Az élesztő mesterséges kromoszóma (YAC) és az M13 fágvektor két típus közülük. A YAC és az M13 fágvektor közötti legfontosabb különbség az, hogy YAC egy mesterséges kromoszóma, amely az élesztősejtekben replikálódik míg az M13 fágvektor az M13 bakteriofág egyszálú kör alakú DNS, amely E coli sejtekben.
Tartalomjegyzék
1. Áttekintés és kulcskülönbség
2. Mi az YAC
3. Mi az M13 Phage Vector
4. Side by Side Összehasonlítás - YAC vs M13 Phage Vector
5. Összefoglaló
Mi a YAC-vektor?
YAC egy mesterségesen épített kromoszóma, amely képes arra, hogy egy nagy részét idegen DNS-t hordozza és replikáljon az élesztősejtekben. Centromere, telomere és autonóm módon replikálódó szekvenciákkal rendelkezik, amelyek elengedhetetlenek a replikációhoz és stabilitáshoz. A YAC-nak szelektív markert vagy markereket és restrikciós helyeket is kell viselnie, hogy hatékony klónozó vektornak lehessen. Nagyméretű, 1000 kb-től 2000 kb-ig terjedő szekvenciákat lehet beilleszteni YAC-ba, és átvinni az élesztőbe.
01. ábra: YAC vektor
Mi az M13 fágvektor?
Az M13 bakteriofág olyan vírus, amely fertőz és replikál E Coli -en. Az M13 bakteriofág genomja kicsi, körülbelül 6,7 kb. Ez egy egyszálú, körkörös és pozitív értelemben vett DNS. Ez a vírus specifikusan E Coli baktériumot fertőzi F piluson keresztül. Amint belép az ssDNS-be a baktériumba, szintetizálja a komplementer szálat, és dsDNS-ből vagy az M13 replikatív formájává (RF) lesz. Az RF képes úgy viselkedni, mint egy plazmid a gazdaszervezeten belül. A dsDNA E Coli -en belül replikálódik, és új fágokat hordozó ssDNS-t állít elő. Ezek az új fágok folyamatosan felszabadulnak a E Coli -ről a gazdasejt megölése nélkül. Azonban a fertőzés lelassítja az E Coli növekedését. A dsDNS baktériumsejtekből extrahálható és DNS-klónozás vektoraként alkalmazható.M13 fágvektorok néven ismertek. Ezek könnyen manipulálhatók és hasonlóan alkalmazhatók a plazmidvektorokhoz.
Az ilyen M13 fágok fertőzésének inherens képessége jó képesítést jelent, amelyet vektorként használnak gének klónozásában. Az M13 vektorba történő fejlesztésekor több elemet kell beépíteni a genomjába. Ezek a lac represszor (lacI) fehérje génjei, a lac Z gén, a lac promoter és a többszörös klónozóhely (polilinker) operátor-proximális régiója. Ha az M13 dsDNS-t vektorokként alkalmazzuk, akkor plazmidvektorként kezelhetjük. Mindazonáltal az ssDNA M13 alkalmazása előnyös a DNS szekvenálásában és a helyspecifikus mutagenezisben.
Mivel az M13 fágvektor több klónozóhelyet hordoz lacZ régióban, a rekombinált vektorok könnyen azonosíthatók az IPTG és az X-Gal tartalmú agar lemezeken végzett kék / fehér kolónia szűréssel. A lemezeken előállított kék plakkok nem tartalmazzák a rekombinált fágokat. Ezért klónozási célra választható fágok beillesztéssel.
02. ábra: M13 bakteriofág
Mi a különbség a YAC és az M13 fágvektor között?
- diff Artikkel Közel a táblázat előtt ->
YAC vs M13 Phage Vector |
|
| YAC egy genetikailag megtervezett kromoszóma, amely képes arra, hogy egy nagy részét idegen DNS-t hordozza és replikáljon az élesztősejtekben. | Az M13 fágvektor az M13 bakteriofág által kifejlesztett vírusvektor, amelyet arra használnak, hogy az idegen DNS-t E Coli-ba helyezze. |
| Cél | |
| A YAC-kat arra tervezték, hogy a genomiális DNS nagy fragmenseit élesztővé klónozzák. | M13 fágvektorokat használunk az idegen DNS beillesztésére E Coli-ba. |
| Insert Length | |
| A YAC-ok tartalmazhatnak megabájtméretű genomi betéteket (1000 kb - 2000 kb). | A betétek mérete körülbelül 1, 500 bps. |
| Az építőipar | |
| Az YAC DNS-t nehezen tisztíthatjuk érintetlenül és nagy koncentrációt igényel YAC vektorrendszer létrehozásához. | Ez ciklikus fotoszintetikus elektron láncon keresztül történik. |
| Stabilitás | |
| YAC instabil. | Az M13 fágok könnyen kinyerhetők. |
| Méret | |
| Az enzimek nagyobb molekulák. | Az M13 fágok stabilak, mint a YAC. |
Összegzés - YAC vs M13 Phage Vector
YAC egy mesterségesen megalkotott vektorrendszer, amely egy élesztő kromoszóma specifikus régióját alkalmazza, hogy genetikai anyag nagy szegmenseit beillesszék az élesztősejtekbe. Az M13 fágvektor egy olyan M 13 bakteriofágból származó vektorrendszer, amely E coli gazdaszervezetként használatos. Ez a fő különbség a YAC és az M13 Phage Vector között. Mindkettő ugyanolyan hasznos a rekombináns DNS-technológiában és a gének klónozásában.
Referencia:
1. "Vektor. "Genetikai jegyzetek - Vektor. N. p., n. d. Web. 2016. május 16-án. // genetika-jegyzetek. Wikispaces. com / Vector
2. "Élesztő mesterséges kromoszóma. "Wikipedia. Wikimedia Alapítvány, 2017. április 21. Web. 2017. május 16.
Kép jóvoltából:
1. "M13B" J3D3 - Saját munkák (CC BY-SA 3. 0) Commons Wikimedia alatt
