Különbség a YAC és az M13 fágvektor között | YAC vs M13 Phage Vector

Anonim

Kulcs különbség - YAC vs M13 fág vektor

A DNS-klónozás fontos folyamat, amely lehetővé teszi a szervezetek fontos DNS-fragmenseinek terjedését. Megköveteli, hogy a specifikus DNS vektor-DNS-sel összekapcsolódjon rekombináns DNS létrehozására, amely átalakul a gazdaszervezetbe. A vektor olyan DNS-molekula, amely viselkedik, mint hordozó, hogy külföldi genetikai anyagot más sejtbe vagy szervezetbe szállítson. Képesnek kell lennie a gazdaszervezeten belüli reprodukálásra és a rekombináns DNS több másolatának előállítására. A DNS-klónozásban különböző típusú vektorok használatosak. Az élesztő mesterséges kromoszóma (YAC) és az M13 fágvektor két típus közülük. A YAC és az M13 fágvektor közötti legfontosabb különbség az, hogy YAC egy mesterséges kromoszóma, amely az élesztősejtekben replikálódik míg az M13 fágvektor az M13 bakteriofág egyszálú kör alakú DNS, amely E coli sejtekben.

Tartalomjegyzék

1. Áttekintés és kulcskülönbség

2. Mi az YAC

3. Mi az M13 Phage Vector

4. Side by Side Összehasonlítás - YAC vs M13 Phage Vector

5. Összefoglaló

Mi a YAC-vektor?

YAC egy mesterségesen épített kromoszóma, amely képes arra, hogy egy nagy részét idegen DNS-t hordozza és replikáljon az élesztősejtekben. Centromere, telomere és autonóm módon replikálódó szekvenciákkal rendelkezik, amelyek elengedhetetlenek a replikációhoz és stabilitáshoz. A YAC-nak szelektív markert vagy markereket és restrikciós helyeket is kell viselnie, hogy hatékony klónozó vektornak lehessen. Nagyméretű, 1000 kb-től 2000 kb-ig terjedő szekvenciákat lehet beilleszteni YAC-ba, és átvinni az élesztőbe.

01. ábra: YAC vektor

Mi az M13 fágvektor?

Az M13 bakteriofág olyan vírus, amely fertőz és replikál E Coli -en. Az M13 bakteriofág genomja kicsi, körülbelül 6,7 kb. Ez egy egyszálú, körkörös és pozitív értelemben vett DNS. Ez a vírus specifikusan E Coli baktériumot fertőzi F piluson keresztül. Amint belép az ssDNS-be a baktériumba, szintetizálja a komplementer szálat, és dsDNS-ből vagy az M13 replikatív formájává (RF) lesz. Az RF képes úgy viselkedni, mint egy plazmid a gazdaszervezeten belül. A dsDNA E Coli -en belül replikálódik, és új fágokat hordozó ssDNS-t állít elő. Ezek az új fágok folyamatosan felszabadulnak a E Coli -ről a gazdasejt megölése nélkül. Azonban a fertőzés lelassítja az E Coli növekedését. A dsDNS baktériumsejtekből extrahálható és DNS-klónozás vektoraként alkalmazható.M13 fágvektorok néven ismertek. Ezek könnyen manipulálhatók és hasonlóan alkalmazhatók a plazmidvektorokhoz.

Az ilyen M13 fágok fertőzésének inherens képessége jó képesítést jelent, amelyet vektorként használnak gének klónozásában. Az M13 vektorba történő fejlesztésekor több elemet kell beépíteni a genomjába. Ezek a lac represszor (lacI) fehérje génjei, a lac Z gén, a lac promoter és a többszörös klónozóhely (polilinker) operátor-proximális régiója. Ha az M13 dsDNS-t vektorokként alkalmazzuk, akkor plazmidvektorként kezelhetjük. Mindazonáltal az ssDNA M13 alkalmazása előnyös a DNS szekvenálásában és a helyspecifikus mutagenezisben.

Mivel az M13 fágvektor több klónozóhelyet hordoz lacZ régióban, a rekombinált vektorok könnyen azonosíthatók az IPTG és az X-Gal tartalmú agar lemezeken végzett kék / fehér kolónia szűréssel. A lemezeken előállított kék plakkok nem tartalmazzák a rekombinált fágokat. Ezért klónozási célra választható fágok beillesztéssel.

02. ábra: M13 bakteriofág

Mi a különbség a YAC és az M13 fágvektor között?

- diff Artikkel Közel a táblázat előtt ->

YAC vs M13 Phage Vector

YAC egy genetikailag megtervezett kromoszóma, amely képes arra, hogy egy nagy részét idegen DNS-t hordozza és replikáljon az élesztősejtekben. Az M13 fágvektor az M13 bakteriofág által kifejlesztett vírusvektor, amelyet arra használnak, hogy az idegen DNS-t E Coli-ba helyezze.
Cél
A YAC-kat arra tervezték, hogy a genomiális DNS nagy fragmenseit élesztővé klónozzák. M13 fágvektorokat használunk az idegen DNS beillesztésére E Coli-ba.
Insert Length
A YAC-ok tartalmazhatnak megabájtméretű genomi betéteket (1000 kb - 2000 kb). A betétek mérete körülbelül 1, 500 bps.
Az építőipar
Az YAC DNS-t nehezen tisztíthatjuk érintetlenül és nagy koncentrációt igényel YAC vektorrendszer létrehozásához. Ez ciklikus fotoszintetikus elektron láncon keresztül történik.
Stabilitás
YAC instabil. Az M13 fágok könnyen kinyerhetők.
Méret
Az enzimek nagyobb molekulák. Az M13 fágok stabilak, mint a YAC.

Összegzés - YAC vs M13 Phage Vector

YAC egy mesterségesen megalkotott vektorrendszer, amely egy élesztő kromoszóma specifikus régióját alkalmazza, hogy genetikai anyag nagy szegmenseit beillesszék az élesztősejtekbe. Az M13 fágvektor egy olyan M 13 bakteriofágból származó vektorrendszer, amely E coli gazdaszervezetként használatos. Ez a fő különbség a YAC és az M13 Phage Vector között. Mindkettő ugyanolyan hasznos a rekombináns DNS-technológiában és a gének klónozásában.

Referencia:

1. "Vektor. "Genetikai jegyzetek - Vektor. N. p., n. d. Web. 2016. május 16-án. // genetika-jegyzetek. Wikispaces. com / Vector

2. "Élesztő mesterséges kromoszóma. "Wikipedia. Wikimedia Alapítvány, 2017. április 21. Web. 2017. május 16.

Kép jóvoltából:

1. "M13B" J3D3 - Saját munkák (CC BY-SA 3. 0) Commons Wikimedia alatt