Különbség a gélelektroforézis és az SDS oldalán | Gel Electrophoresis vs SDS Page

Kulcs különbség - gélelektroforézis vs SDS oldal

A gélelektroforézis egy olyan technika, amely elválasztja a makromolekulákat egy elektromos mezőben. A Molekuláris biológia közös módszere a DNS, RNS és fehérjék molekulaméretük szerinti keverékéből való elválasztása. Az SDS oldal egyfajta gélelektroforézis, amelyet a fehérjéknek a fehérje-keverék méretük alapján való elválasztására használnak. A gélelektroforézis olyan kifejezés, amelyet a DNS, az RNS és a fehérje elválasztása , míg a SDS Page egyfajta gélelektroforézisre alkalmaznak. Ez a legfontosabb különbség a gélelektroforézis és az SDS Page között.

Tartalomjegyzék

1. Áttekintés és kulcskülönbség

2. Mi a gélelektroforézis

3. Mi az SDS Page

4. Oldalankénti összehasonlítás - gélelektroforézis vs SDS Page

5. Összefoglaló

Mi a gélelektroforézis?

A gélelektroforézis egy közös technika, amelyet a laboratóriumokban használnak feltöltett molekulák, például DNS, RNS, fehérjék stb. Elválasztására keverékeikből. A gélt gélelektroforézisben alkalmazzuk. Molekuláris szitaként működik. A gélelektroforézisben kétféle gélek használhatók: agaróz és poliakrilamid. A gél és a gélkészítmény kiválasztása fontos tényezők, amelyeket a gélelektroforézisekben figyelembe kell venni, mivel a gél pórusméretét gondosan manipulálni kell a molekulák gélelektroforézissel történő jó elválasztására. A gélelektroforézisnek van egy elektromos mezője, amely a gél két vége felé van csatlakoztatva. A gél egyik vége pozitív töltést mutat, míg a másik vége negatív töltésű.

A DNS és az RNS negatív töltésű molekulák. Miután a gél negatív vége felé kerültek a gélbe, és az elektromos térre kerültek, a gél pórusain át a gél pozitív töltésű vége felé vándorolnak. A migráció sebessége a töltés és a molekula méretétől függ. A kisebb molekulák könnyen átjuthatnak a gél pórusain, mint a nagyobb molekulák. Ezért a kisebb molekulák hosszú távúak a gélen keresztül, és a nagyobb molekulák rövid távon haladnak. A molekulák gélen való utazásának megfigyeléséhez speciális festéktípusokat alkalmaznak. Az elektromos mezőt egy bizonyos ideig alkalmazzák, és megállítják a molekulák elvesztését és a molekulák megtartását a megtett helyeken. Különböző sávok figyelhetők meg a gélben.Ezek a sávok képviselik a különböző méretű molekulákat. Ezért a gélelektroforézis a molekulák méretének megfelelően differenciálható.

A gélelektroforézis a Molekuláris biológiában, mint például a PCR, az RFLP, a klónozás, a DNS-szekvenálás, a déli blotolás, a genomok feltérképezése stb., Előkészítő technikát foglalja magába.

01. ábra: Agaróz gél elektroforézis

Mi az SDS oldal?

A nátrium-dodecil-szulfát poliakrilamid gélelektroforézis

(SDS Page) egyfajta gélelektroforézis, amelyet a fehérjék elválasztására használnak. Amikor a gélelektroforézist fehérjék szétválasztására használják, speciális kezelésekre van szükség, mivel a fehérjék nem negatívan töltődnek, mint a DNS és az RNS, és nem vándorolnak a pozitív vagy negatív vég felé. Ezért a fehérjéket denaturálják és a gélelektroforézist megelőzően negatív töltéssel vonják be. Ezt nátrium-dodecil-szulfát (SDS) nevű mosószerrel végezzük. Az SDS-t és a hordozóanyagot tartalmazó poliakrilamid gélt használó gélelektroforézist SDS Page néven ismert. Ezt a technikát általában a biokémia, a genetika, a kriminalisztika és a molekuláris biológia területén használják. Az SDS oldal alatt a fehérjéket SDS-vel keverik. Az SDS a fehérjéket lineáris alakúra bontja ki, és molekulasúlyukkal arányos negatív töltet bevonásával. A negatív töltésnek köszönhetően a fehérjemolekulák a gél pozitív töltési vége felé vándorolnak és molekulaméreteik szerint elválnak. Az SDS oldalon a poliakrilamidot a gél szilárd hordozójaként használják. A fehérjék tényleges szétválasztása elsősorban a gél tulajdonságaitól függ. Ezért a poliakrilamid gélkészítést gondosan meg kell tenni, és a megfelelő poliakrilamid koncentrációkat kell használni. A poliakrilamid gélek nagy felbontásúak, mint az agarózgélek. Ezért az SDS oldal nagyfelbontású technikának számít a fehérje-elválasztáshoz.

Az SDS oldal egy denaturáló gélelektroforézis. Jelentősen korlátozza a fehérjeelemzést. Mivel az SDS az elválasztást megelőzően denaturálja a fehérjéket, ez nem teszi lehetővé enzimaktivitás, fehérjekötő kölcsönhatások, fehérje kofaktorok kimutatását.

02. ábra: SDS oldal

Mi a különbség a gélelektroforézis és az SDS oldal között?

- diff Artikkel Közel a táblázat előtt ->

Gélelektroforézis vs SDS oldal

A gélelektroforézis egy módszer, melyet elektromos makromolekulák elkülönítésére használnak.
Az SDS Page egy nagy felbontású gélelektroforézis technika, amelyet a fehérjék tömegük alapján történő elválasztására használnak.	Gel Run
Ez vízszintes vagy függőleges módon hajtható végre.
Az SDS oldal mindig függőlegesen fut.	Az elválasztás alapja
Az elválasztás a töltés és a méret alapján történik.
A fehérje elválasztása a tömeg és a töltés szerint történik.	Felbontás
Az agaróz gélelektroforézis alacsony felbontású és a poliakrilamid gélelektroforézis nagyobb felbontású
SDS oldala jobb felbontású.	Denaturáció
A gélelektroforézis mind denaturáló, mind nem denaturáló technikákat tartalmaz.
Az SDS Page denaturálja a fehérjéket az elválasztást megelőzően.	Összefoglaló - gélelektroforézis vs SDS oldal

A gélelektroforézis a DNS, az RNS és a fehérjék méretének és töltetének alapján történő szétválasztására és elemzésére alkalmazott közös technika. A gélelektroforézis két fő típusa: az agaróz gélelektroforézis és a poliakrilamid gélelektroforézis. Az agaróz géleket elsősorban a nukleinsav elválasztására használják; ha nagyobb felbontás szükséges, poliakrilamid géleket használunk. Az SDS oldal egy olyan típusú gélelektroforézis, amelyet általában fehérjék összetett keverékeinek elválasztására használnak. Nagy felbontású fehérje-elválasztási technikának tekintjük. Ez a különbség a gélelektroforézis és az SDS Page között.

Referenciák:

1. Nowakowski, Andrew B., William J. Wobig és David H. Petering. "Az eredeti SDS-PAGE: a fehérjék nagy felbontású elektroforetikus elválasztása az eredeti tulajdonságok megőrzésével, beleértve a kötött fémionokat. www. NCBI. NLM. NIH. gov. N. p., 2014. május. Web. 2017. április 7.

2. Stellwagen, Nancy C. "A DNS elektroforézise agarózgélekben, poliakrilamid gélekben és szabad oldatban. "Elektroforézis. U.S. Orvosi Nemzeti Könyvtár, 2009. június. 2017. 07. 07.

Kép jóvoltából:

1. "Gelelektrophoreseapparatur" (CC BY-SA 3. 0) Commons Wikimedia alatt

2. "DNA Agarose gel electrophoresis" Az Ann Arbor-i Természettudományi Iskola - DNS labor (CC BY 2. 0) Commons Wikimedia alatt