Különbség az SDS PAGE és a gélelektroforézis között A

Anonim

SDS PAGE vs gélelektroforézis

Az elektroforézist egy objektum tömegére általában a fehérje és a deoxiribonukleinsav (DNS) meghatározására lehet felhasználni. A DNS szál, amikor vegyi anyagba kerül, felgyorsíthatja vagy lelassíthatja az információs folyamatot. Az ismert tömegű DNS-jelölőket az elektroforézis befejezése után az objektumok méretének közelítésére használják. Az elektroforézis valószínűleg a molekuláris biológusok és biokémikusok számára leginkább használt eszköz.

Kétféle elektroforézis létezik, amelyek általánosan használatosak ebben a folyamatban. Ezek a nátrium-dodecil-szulfát poliakrilamid gélelektroforézis (SDS-PAGE) és a natív gélelektroforézis.

Az SDS-PAGE egy nem-szelektív módszer a gélelektroforézisre, amelyet olyan területeken használnak, mint a biokémia, a kriminalisztika, a biológia és a genetika, hogy elkülönítsék a fehérjét az elektroforetikus mobilitástól. Az SDS egy olyan anionos felületaktív anyag, amely segít a sejtek lízisében a DNS-extrakció és a fehérjék SDS-PAGE-ban történő elválasztása során. Az elektroforézis során a fehérje keverékét először cseppentjük SDS oldatban. Ezután a Mercaptoeetanol nevű anyagot alkalmazzuk a diszulfidkötések eltávolítására, hogy a fehérje lineáris legyen. Ezután elektroforézist indítanak. Az eredmények két molekula maradékot eredményeznek, amelyek közül az egyik az SDS-PAGE.

Az SDS-PAGE hiánya nem jelent problémát, mivel a gélelektroforézis csak akkor végezhető el, ha a fehérjék nem veszítik el másodlagos és tercier struktúrájukat, és nem nyílnak meg általában egyenes rudakká.

Eközben a natív gélelektroforézis a gélt antikonvektív anyagként alkalmazza. Általában biológiai makromolekulák, például DNS, ribonukleinsav (RNS) és fehérje szétválasztására használják. A nanorészecskék szétválasztására is használható.

A natív gélelektroforézisben két fő gél van, nevezetesen:

Agaróz gél, amelyet nagyobb molekulákhoz használnak. Ez a gél nem azonosítja a két molekulasáv közötti kis különbségeket. Ugyancsak a DNS szétválasztására szolgál. Az agarózgélt az etidium-bromid keverékével végezzük.

A poliakrilamid gél, amelyet kisebb molekulákra használnak. Ez a gél azonosítja a molekulasávok közötti különbségeket. A DNS mellett elkülönítheti a fehérjéket is.

Összefoglaló:

1. Az SDS-PAGE nem szelektív módszer a gélelektroforézisre olyan területeken, mint a biokémia, a kriminalisztika, a biológia és a genetika, hogy elkülönítsék a fehérjét elektroforetikus mobilitásától, míg a gélelektroforézist általában biológiai makromolekulák, például DNS, ribonukleinsav (RNS) és a fehérje. A nanorészecskék szétválasztására is használható.

2. A natív gélelektroforézisnek két típusa van: az agarózgél és a poliakrilamid gél.