Transzformáció és transzfekció | Transzformáció és transzfekció közötti különbség

Transzformáció és transzfekció

Transzformáció és transzfekció két egyszerű technika, amelyeket egy idegen gén bejuttatására használnak gazdasejtben. Ezek a technikák azonban a gazdaszervezet vagy a vektorrendszerek típusától függenek.

Mi a Cell Transformation?

Az átalakulás az a módszer, amelyet az élesztőgomba és a baktériumsejtek génjének bejuttatására alkalmaznak. Ez a módszer általában örökletes változásokat okoz a génekben, így a gén expressziója állandó. A bakteriális transzformációt először 1928-ban mutatta be Frederick Griffith. Ezután a hetvenes évek elején ezt a technikát

E-ben használták. coli. A E. coli, a sejteket jéghideg CaCl 2 oldatban áztatják. Ez a lépés _{E. coli} sejtek kompetensek. Ezután az illetékes sejteket összekeverjük a plazmid DNS-sei, és jégen inkubáljuk 20-30 percig. Ezután rövid hősokk adódik annak érdekében, hogy lehetővé tegye a DNS átjutását a sejtbe. Végül a sejteket tápközegbe helyezzük, és 37 ° C-on inkubáljuk 60-90 percig a plazmidok létrehozása érdekében. Miután ezeket a lépéseket sikeresen befejeztük, a transzformált sejteket megfelelő táptalajra helyezhetjük a sejtek szaporítására. Mivel az átalakulást nem hatékony technikának tekintik, nem alkalmazható klón bankok készítésére. Mi a sejt transzfekció?

A transzfekció egy idegen gén, általában az emlőssejtekbe történő bevezetésének módja. Kétféle transzfekciós módszer létezik; nevezetesen tranziens transzfekció és stabil transzfekció. Átmeneti transzfekció esetén a génexpresszió korlátozott ideig rendelkezésre áll; így a gén megváltoztatása ideiglenes kifejezést idéz elő. Ez a transzfekciós módszer egyszerű és gyors; ezért rutinszerűen használható. A tranziens transzfekció egyik hátránya a nagy léptékű proteinszintézis rendszerek alkalmazásának nehézsége.

Stabil transzfekció esetén a célgén beépül a gazdasejt genomjába, így a gén expressziója állandó, a tranziens transzfekciótól eltérően.

Mi a különbség az átalakulás és a transzfekció között?

• Az átalakulás egy gén bevezetése egy prokarióta sejtbe (bakteriális és élesztő), míg a transzfekciót rendszerint gén bevezetésnek nevezik emlőssejtként.

Az átalakulás örökletes változást eredményez a génekben, míg a transzfekció átmeneti kifejeződést vagy állandó változásokat eredményezhet a génekben.